倒置荧光显微镜使用步骤及注意事项

未经培训考核不得擅自使用！

一、明场观察

1. 先打开白光光源开关，再打开显微镜左侧白色按钮；

2. 将玻片或孔板置于载物台

（1）观察HE染色片子：选择A模式；

（2）观察细胞：根据需求选择PHL（4倍）或PHL1（10倍和20倍）或PHL2（40倍）模式；

3. 调节白光光源和焦距，观察细胞；

4. 如果需要拍照（Options）

（1）首先打开电脑，待开机完成，再打开荧光显微镜左侧的相机开关，然后双击电脑上elements软件；

（2）选择Bright Field模式，将玻片或孔板移动至空白处，白平衡；

（3）将玻片或孔板置于载物台，一般选择自动曝光，调整好焦距和视野；

（4）点击Capture采集照片，然后选择File，点击Auto Save或者手动保存。

5. 关机：

（1）将电脑关机，然后将荧光显微镜光源调至最暗，再关闭白色按钮；

（2）将物镜镜头旋转到空的镜头下，减少镜头落灰；

（3）关闭白光光源开关；

（4）待汞灯冷却之后，将防尘罩盖在荧光显微镜上。

二、暗场观察

1. 打开白光光源开关，再打开显微镜左侧白色按钮；

2. 打开荧光开关，待黄灯变绿之后，再打开黑色激发光按钮；

3. 将孔板置于载物台，根据需求选择PHL或PHL1或PHL2模式；

4. 调节白光光源和焦距，视野下观察到细胞；

5. 关闭白色按钮，然后打开光栅

（1）观察绿色荧光，将光栅调至Blue模式；

（2）观察红色荧光，将光栅调至Red模式。

6. 如果需要拍照（Options）

（1）首先打开电脑，待开机完成，再打开荧光显微镜左侧的相机开关，然后双击电脑上elements软件；将显微镜视野模式从Eye调至Side；

（2）选择DF/FL模式，将玻片或孔板移动至空白处，白平衡；

（3）将玻片或孔板置于载物台，手动调节曝光时间；

（4）点击Capture采集照片，然后选择File，点击Auto Save或者手动保存；

（5）如果需要采集同一视野下的明场照片

A. 关掉光栅；

B. 打开显微镜左侧白色按钮；

C. 选择Bright Field模式，白平衡；

D. 点击Capture采集照片，然后选择File，点击Auto Save或者手动保存。

（6）关机

A. 将电脑关机，然后将荧光显微镜光源调至最暗，再关闭白色按钮；

B. 关闭光栅，将物镜镜头旋转到空的镜头下，减少镜头落灰；

C. 关闭荧光开关，关闭白光光源开关；

D. 待汞灯冷却之后，将防尘罩盖在荧光显微镜上。

注意事项：

1. 未经培训和考核通过的人员，禁止独立使用倒置荧光显微镜。

2. 倒置荧光显微镜的使用实行预约制，请提前至少一天进行预约登记。

3. 为延长汞灯寿命，打开汞灯后不可立即关闭，以免水银蒸发不完全而损坏电极，切记开机用满30 min后才能关机。

4. 汞灯熄灭后待完全冷却才能重新启动，否则灯内汞蒸气尚未恢复到液态，内阻极小，再次施加电压，会引起短路，导致汞灯爆炸。这样不仅损坏电器，更重要的是汞蒸气溢出，将导致工作室污染。故关闭汞灯之后，不能马上再次打开，切记关机30min后才能再次开机使用。

5. 如使用过程中遇到不可解决的问题，请不要私自乱调设置，请联系程巧老师15895567186。